第二节 DNA的结构与功能
一、DNA碱基组成规律
DNA碱基组成规律:A=T,G=C。
二、DNA二级结构(双螺旋结构)要点
1.DNA分子由两条以脱氧核糖- 磷酸作骨架的双链组成,以右手螺旋的方式围绕同一公共轴有规律地盘旋。螺旋直径2nm,并形成交替出现的大沟和小沟。
2.两股单链的戊糖- 磷酸骨架位于螺旋外侧,与糖相连的碱基平面垂直于螺旋轴而伸入螺旋之内。每个碱基与对应链上的碱基共处同一平面,并以氢键维持配对关系,A 与T配对,C 与G 配对。螺旋旋转一周为10对碱基。
3.两碱基之间的氢键是维持双螺旋横向稳定的主要化学键。纵向则以碱基平面之间的碱基堆积力维持稳定。
4.双螺旋两股单链走向相反,从5′向3′端追踪两链,一链自下而上,另一链自上而下。
三、DNA的三级结构
原核生物:超螺旋结构
真核生物:DNa+组蛋白。5种组蛋白(H):H1,H2A, H2B, H3, H4,其中 H2A, H2B, H3, H4各两分子形成八聚体,DNA围绕八聚体 形成核小体。
DNA的功能:遗传的物质基础,遗传信息的携带者。
第三节 DNA变性及其应用
1.DNA的变性,复性:
(1)变性:在理化因素作用下,DNA互补碱基对的氢键断裂,其双螺旋链解离为单链为DNA变性,通常以热变性为例。
高色效应:核酸变性后、氢键破坏,双螺旋结构破坏,碱基暴露,紫外吸收(260nm)增强,谓高色效应。
(2)解链温度融解温度(Tm)
UV吸收增值达到最大吸收增值50%时的温度,称Tm。
Tm值与 DNA G+C含量有关,G+C含量愈大,Tm愈高,反之则低。与核酸分子长度有关,分子愈长,Tm愈高。
(3)DNA变性的复性
DNA发生热变性后,经缓慢降温,如放置室温逐渐冷却,解开的互补链之间对应的碱基对再形成氢键,恢复完整的双螺旋结构,称DNA热变性的复性。